一、原理及び適用範囲
乳糖胆塩選択性培地とTTC発色剤を紙上に添加し、培養後紙上で乳糖産酸を成長させ発酵させることができるのは大腸菌群陽性であり、希釈度大腸菌群陽性紙上数を記録し、大腸菌群MPN表に基づいて対応する大腸菌群数を検出した。食品大腸菌群検査紙片法は国標準法中の九管法に対応し、元の数段階の試験を1段階に簡略化し、時間を78 hから24 h以内に短縮し、培地の製造、消毒、培養器の洗浄処理などの大量の補助的な仕事を省き、いつでも包装を開けてサンプリング検査を行うことができる。実行基準：食品安全国家標準食品微生物検査大腸菌群計数MPN計数法（GB 4789.3）。
二、操作方法
1、サンプル処理：無菌操作によってサンプル25 g（または25 mL）を秤量し、225 mLの滅菌リン酸緩衝液希釈液（または生理食塩水）を含むサンプリングボトルまたは均質カップに入れ、十分に振盪して1：10のサンプル均質液にした。試料均質液のpH値は6.5〜7.5の間であり、必要に応じて1 mol/L水酸化ナトリウムまたは1 mol/L塩酸で調整する。1 mLの滅菌ストローで1：10試料の均質液を吸引し、9 mLの希釈液を含む試験管内に注入し、試験管を揺動して1：100試料の均質液を作製した。サンプル汚染状況の推定に基づいて、上記操作に従って、一度に10倍増加シリーズ希釈サンプル均質液を作成した。増分希釈1回ごとに、1 mLの無菌ストローまたは吸引ヘッドを交換します。サンプルの均質液の調製からサンプルの接種完了まで、全過程は15 minを超えてはならない。
2、接種
2.1、2つの希釈度を選んで接種し、普通の食品は一般的に1：10と1：100の2つの希釈度を採用し、飲み物は原液と1：10の2つの希釈度を採用する。本品は3枚の大きな紙片（10 mLを受け、袋の幼稚な紙片を重ねて1枚とする）、6枚の小さな紙片（1 mLを受け取る）から構成されている。
2.2、滅菌ストローで10 mL 1：10サンプルの均質液を吸収して、大きな紙片を含むプラスチック袋に入れ（サンプル1 gを受け取ることに相当する）、吸収して平らに置き、3つの繰り返しをする。さらに1 mLの滅菌ストローを用いて1 mLの同一希釈度のサンプル液を吸い上げ、紙片を含むビニール袋（サンプル0.1 gを接合するのに相当）に均質液を加え、3回繰り返した。もう1本の1 mL滅菌ストローを採取して1 mL 1：100サンプルの均質液を吸収し、小さな紙片を含むビニール袋（サンプルを受けて0.01 gに相当）に加え、3回繰り返した。
3、培養：接種した紙片（積み重ね可能）を36℃±1℃培養箱に入れて15〜24時間培養する。
三、大腸菌群の最大可能数（MPN）の報告
1、紙片が黄色くなったり、黄色の背景に赤い斑点が現れたりすると、大腸菌群陽性紙片となる。紙片は紫青色のままであるか、紫青色の背景に赤色の斑点を呈しているが、周囲に黄色がなく、いずれも大腸菌群陰性紙片である。
2、希釈度大腸菌群当たりの陽性紙片数を記録し、『食品飲料大腸菌群MPN表』に基づいて相応の大腸菌群数を検出した。
3、接種の最初の勾配が原液であれば、表で検出された結果を10で割るべきである。
四、注意事項
新しい国家基準で使用されている単位は、1グラム（またはミリリットル）当たりの検体中の大腸菌群の最も可能な数に変更され、標準的な接種量は0.333 g（mL）であり、MPN表もこれにより設計された。本品を使用する標準接種量は3.33 g（mL）であり、大紙片接種10 mL 1：10試料均質液は1 g試料に相当するため、表内の数字は相応して10倍下げるべきである。飲料サンプルの接種量は33.3 mL、大紙片は10 mLサンプル原液を接種し、表中の数字は100倍下げるべきである。
五、保存条件
本製品は4℃〜10℃の冷蔵庫に保管する必要があり、賞味期限は1年であり、アルミニウム箔袋を開けた後、使い切れていない紙片はアルミニウム箔袋に戻して封をし、冷蔵庫に入れ、1ヶ月以内に使い切る。高湿度の環境では凝縮水が発生する可能性があり、開封前に全包を室温に戻したほうがよい。

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